經導管主動脈瓣膜瓣葉增厚和衰敗的組織學分析

2018-12-27 14:56 來源:丁香園 作者:
字體大小
- | +

JACC:CARDIOVASCULAR IMAGING 最近報道了一篇文獻,對已接受過 TAVR 治療患者的人工瓣膜進行組織學研究,取出生物瓣的方式為尸體解剖或手術。

研究對取得的瓣膜標本進行病理切片處理,其中 HE 染色、Movat 染色及 Von Kossa 染色分別用于評估切片整體病理分析、纖維化及鈣化程度。免疫組化染色用來評估細胞表面蛋白表達,其中 CD31 作為內皮細胞標志物,CD45 作為炎癥細胞浸潤標記,MMP-1 則提示細胞外基質的聚集及重塑。另外光子共聚焦顯微鏡及電鏡分別用于分析切片內膠原蛋白、彈力蛋白成分以及鈣化。

研究最終納入來源于 22 個患者的 23 個瓣膜樣本,其中 20 個是由尸體解剖所得。患者平均年齡為 81.17 歲,有 2 位患者為二葉式主動脈瓣。樣本的具體情況如表 1 所示。

640.jpg

1. 瓣葉厚度

研究發現植入體內超過 2 年的生物瓣,其最大瓣葉厚度大于植入時間低于 2 年的瓣膜(圖 1A 及 1B)。另外,瓣葉厚度隨時間的增加而增加(圖 1C)。

640 (1).jpg
圖 1 A:不同時間瓣膜切片的 HE 染色;B:植入時間大于 2 年與小于 2 年瓣膜的厚度比較;C:瓣葉厚度隨植入時間的改變?

2. 血栓形成

血栓幾乎在釋放后立即形成(植入時間 0 天,Sapien 3 瓣膜,由手術方式取出)。盡管取出的生物瓣可能受到急性并發癥的影響,但是血栓幾乎出現在所有研究的瓣膜中,早至術后 1 天,晚至術后 2583 天。血栓在主動脈及心室均有發現,其形狀既有層狀,也有乳頭狀,提示血栓可能在層流或湍流的模式下形成(圖 2E)。在植入時間小于 30 天的亞組分析中發現 50% 的樣本出現瓣葉血栓,且以瓣葉基底部為主(圖 2F)。

640 (2).jpg
圖 2 A、B、C:分別表示血栓,纖維化及鈣化形成;E:血栓的層狀及乳頭狀形態;F:早期血栓形成(60 天以內)多在瓣葉基底部?

3. 瓣膜內皮及炎癥

基于早期血栓形成的觀察,可以假設血栓形成在瓣膜內皮化之前。然而,CD31+的類內皮細胞在幾乎所有瓣膜標本中表達(包括那些植入時間只有 1 天的瓣膜),同時形成的血栓覆蓋在內皮細胞之上。CD31+的類內皮細胞呈現出異常的假復層柱狀細胞排列(圖 3A、3B),半定量分析表明此種排列最常出現于植入時間為 8-30 天的瓣膜上。另外多核巨細胞、CD45+細胞的發現均提示有炎癥細胞的浸潤(圖 3D、3E)。

640 (3).jpg
圖 3 A、B:CD31 的半定量分析證明植入時間 1 月較 1 周的生物瓣期內皮細胞的增生明顯增加;C、D:CD45/LCA 表達證明炎癥細胞浸潤,E 表明 HE 染色切片上可見巨大細胞,多核巨細胞及中性粒細胞浸潤?

4. 纖維化

血栓合并纖維化的形成在植入時間超過 60 天的生物瓣中均有發現,纖維化同時還出現在主動脈及心室表面(圖 2B)。瓣葉纖維化的過程提示有再重塑及再機化的機制,因組織染色提示有非成熟-成熟纖維組織的形成過程。亞組分析表明在植入后 946,1611 天及 2496 天,同一切片可出現不同程度的纖維化,其中不成熟纖維組織中的核心蛋白聚糖較成熟纖維組偏少,而 MMP-1 作為可調控膠原重塑的蛋白在纖維組織的部位也有表達(圖 4)。

640 (4).jpg
圖 4:纖維化瓣膜的亞組分析,在植入后 946,1611,2496 天?

5. 鈣化

在 4 例植入時間超過 4 年的生物瓣中,鈣化、血栓及纖維化均有形成(圖 2C)。由于瓣中瓣或感染性心內膜炎可能對鈣化造成影響,故排除這兩部分患者后發現鈣化最早在植入時間為 145 天的患者出現。在 5 例出現鈣化的生物瓣中,鈣化部位同時伴有粘附血栓及纖維組織,其發生的部位局限在瓣葉,并因此破壞了瓣膜結構(圖 5B 為電鏡圖)。

640 (5).jpg
圖 5 A:瓣膜鈣化、血栓及纖維組織出現在生物瓣瓣葉;B:電鏡下觀察到的鈣化組織?

總結

本研究從組織學的角度觀察經導管人工瓣膜植入體內后的表現,發現經導管生物瓣植入體內后有血栓形成、增厚、纖維化和鈣化等改變,為今后人工瓣膜耐久性的研究和抗栓的治療策略奠定了一定的基礎。

參考文獻

Transcatheter Aortic Heart Valves:Histological Analysis Providing Insight to Leaflet Thickening and Structural Valve Degeneration. J Am Coll Cardiol Img 2018.

文章轉載自微信公眾號:?浙二醫院心臟瓣膜團隊

圖片來源:浙二醫院心臟瓣膜團隊(題圖有剪裁)

編輯: 朱卿

版權聲明

本網站所有注明“來源:丁香園”的文字、圖片和音視頻資料,版權均屬于丁香園所有,非經授權,任何媒體、網站或個人不得轉載,授權轉載時須注明“來源:丁香園”。本網所有轉載文章系出于傳遞更多信息之目的,且明確注明來源和作者,不希望被轉載的媒體或個人可與我們聯系,我們將立即進行刪除處理。同時轉載內容不代表本站立場。

一级a做爰片_免费一级特黄大片_日本一级特黄大片